仙客来为报春花科仙客来属的球根观花植物。一方而仙客来变异性大,寻找优良变异株组培,能获得大量优良种苗。另一方而,仙客来常规扦插种苗带病毒严重,栽培养护难度很大,甚至造成种苗大批*亡,导致成花品质极差,影响经济效益。通过组培可脱病毒,不仅减轻栽培养护难度,还可提高种苗及成花品质。本研究不仅为仙客来工厂化生产提供大量的健壮抗逆性能强,可耐-5℃品质优良的种苗,而且还解决了仙客来多年来靠播种退化、扦插带病毒、造成花卉越开花越小、颜色不纯正、品质极差带来的负而影响,并为新品种香型仙客来快繁提供了可能。
1材料
仙客来(中花型鲜红色带香味)的嫩叶。
2培养条件
诱导愈伤组织培养基1)MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Ad 50 mG/L;继代培养基2 ) MS+6-BA 1.5 mg/L++LAA 1 mg/L;生根培养基3 )1 /2MS +IBA 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L ;所有培养基均要添加蔗糖3%、琼脂0.6%,并将pH值调整到5.6-5.8,培养温度12-20℃,光照强度40 Umol/ ( m2 , s ),光照时间12-16 h/d。
3生长与分化情况
3.1启动及诱导培养取嫩叶的叶片,用毛笔蘸洗洁精刷洗,然后把叶片放入玻璃瓶内用
纱窗布扎瓶口,放在流动的自来水下冲洗10 min后,移入超净工作台或无菌箱内,用无菌水冲洗叶片2-3次,再用75%的乙醇处理30 s,然后用0.1 % HgCI2*7 min,无菌水冲洗5次,每次不少于8 min,将嫩叶切取5 mm×5 mm大小接种在诱导愈伤组织的培养基中,经培养6-8周后产生愈伤,继代2次,每次周期6-8周,愈伤处才分化成苗。愈伤组织分化率为85 %,然后移植到继代培养基2)进行增殖。每月继代培养1次,试管苗的增殖系数约5-6倍。
4.2根的诱导和试管苗管理截取1.5cm带3个叶片的苗,移入生根培养基中,当苗上有3-4条2 cm左右长的新根时,一定注意用镊子轻轻取出幼苗,因为仙客来组培苗很脆弱,易受伤。组培苗出瓶后一定要清洗掉苗上的琼脂,然后才可进行移栽。移栽苗初期用经过高锰*钾浸泡过的蛙石,栽后迅速盖上塑料布保湿,空气湿度保持在80%-90%养护。1个月后养护移栽成活率约80%以上。1个月后栽植采用经过*处理的由腐叶、细沙按体积计以1:3的比例配成的混合物中,移栽前期要将空气湿度保持在70%-80%间,遮光率60%-70%,环境温度控制在18-20 0C间,经1-2月的管理,最后即可定植于腐殖质的砂质壤土中。